Par les Drs Piriya Yoganathan et Eric Yung
Des taux de réponse élevés dans des cas de leucémies et de lymphomes à cellules B réfractaires ont été obtenus récemment à l’aide de la thérapie fondée sur les cellules T à récepteurs antigéniques chimériques (CAR), en ciblant l’antigène CD19 associé aux lymphocytes B. La thérapie CAR-T est un traitement hautement personnalisé qui nécessite le transfert d’un gène CAR synthétique à des cellules T d’un patient. Ce processus est effectué par un système lentiviral. La fabrication du lentivirus comporte plusieurs étapes essentielles, soit 1º la fabrication de l’ADN plasmidique codant pour le gène CAR synthétique et les plasmides auxiliaires, 2º le transfert de ces plasmides dans les cellules productrices pour générer le virus, et 3º la récolte et la purification du virus généré.
Un programme hautement collaboratif, multidisciplinaire et multigéographique de BioCanRx, regroupant l’Institut de recherche de l’Hôpital d’Ottawa (IRHO) et l’Agence du cancer de la Colombie-Britannique (BCCA), a été établi afin de créer une filière de développement pour la thérapie CAR-T ciblant l’antigène CD19 au Canada. Aux fins de l’ensemble du programme, l’équipe du Dr Rob Holt (BCCA-Vancouver) est responsable de deux aspects principaux : 1º la conception et la validation préclinique du transfert du système lentiviral et 2º la conception et la validation du vecteur des cellules CAR-T, y compris la génération de l’ADN destiné à la production lentivirale du Centre de fabrication de produits biothérapeutiques (CFPB) de l’IRHO.
Les deux équipes faisaient face au même défi — générer de grandes quantités de lentivirus —, soit pour la BCCA, d’accomplir du travail supplémentaire de validation et d’optimisation de la conception, et, pour le CFPB, de générer des quantités suffisantes pour un usage clinique. Grâce au programme d’échanges entre laboratoires de BioCanRx, le Dr Eric Yung, de l’équipe du Dr Holt, a visité le CFPB à Ottawa en novembre 2017, ce qui a donné lieu à des résultats mutuellement avantageux permettant aux deux parties de faire d’importants progrès pour surmonter leurs défis. Le CFPB a une vaste expertise de la fabrication de virus à grande échelle conforme aux bonnes pratiques de fabrication (BPF), et la visite du Dr Yung lui a permis de mieux comprendre comment les processus individuels à petite échelle peuvent être transposés à plus grande échelle, ou quelles autres possibilités peuvent exister. Le Dr Yung a pu avoir des échanges approfondis avec le personnel chargé des BPF concernant les limitations qui se posent pour les grands volumes de surnageant viral. La transposition d’une production à l’échelle du millilitre à une production à l’échelle du litre comporte des défis importants. Ces défis concernent la détermination des types de récipients qui contiennent la culture cellulaire et pratiquement toutes les étapes de manutention du fluide et de purification en aval du surnageant viral. Le Dr Yung a pu voir l’installation du CFPB et s’entretenir avec le personnel afin de mieux comprendre ces étapes. Il a aussi pu examiner les protocoles avec le personnel du CFPB, afin de mieux savoir comment les adapter à l’installation de la BCCA. Pour sa part, le personnel du CFPB a pu avoir des échanges avec le Dr Yung au sujet de la biologie lentivirale, et du titrage, ainsi que des possibilités de partage facile des données et de discussions en temps réel sur les résultats de différentes études.
Les échanges en personne entre le Dr Yung et le personnel du CFPB qu’a permis le programme d’échanges entre laboratoires de BioCanRx ont été très bénéfiques dans les efforts d’élaboration des processus du programme.
La Dre Piriya Yoganathan est une boursière postdoctorale au Centre de fabrication de produits biothérapeutiques de l’Institut de recherche de l’Hôpital d’Ottawa qui participe à l’élaboration des procédés de fabrication de lentivirus pour la thérapie CAR-T. Elle a obtenu son doctorat avec spécialisation en recherche sur le cancer au Département de pathologie et de médecine moléculaire de l’Université Queen’s.
Le Dr Eric Yung est un scientifique employé par l’Agence du cancer de la Colombie-Britannique et rattaché au laboratoire du Dr Rob Holt, au Centre des sciences génomiques. Il a obtenu son doctorat au Collège de médecine Albert-Einstein en travaillant à comprendre le VIH-1.
